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Determinación de moléculas solubles mediante ELISA multiplex

1. ELISA MULTIPLEX EN EL ANALIZADOR LUMINEX 100 ™

Se utiliza la »tecnología xMAP®« con el analizador Luminex 200 ™ (Luminex® Corporation, Austin, Texas, Estados Unidos).

Esta tecnología es multiparamétrica y posibilita el análisis simultáneo de hasta 100 analitos distintos de una misma muestra en un solo pocillo. Ello supone una elevada productividad, reduciendo [...]

Test: Preguntas tipo test de la sección de diagnóstico inmunológico

1. La inmunodifusión radial simple: 1) es una técnica de inmunoprecipitación. 2) emplea anticuerpos ligados a enzimas. 3) emplea anticuerpos ligados a elementos radioactivos. 4) es un tipo de aglutinación. 5) es un tipo de enzimo-inmunoensayo. 2. En un ELISA que utiliza como conjugado una inmunoglobulina marcada con peroxidasa es necesario añadir en el sustrato: [...]

Histoquímica y citoquímica

HISTOQUÍMICA Y CITOQUÍMICA

Histoquímica es el estudio químico de los tejidos independientemente del método de análisis empleado. En la práctica se emplea la palabra para designar el método junto con el auxilio de los microscopios ópticos (MO) y electrónico (ME).

Esta técnica permite la identificación y localización de compuestos o radicales químicos en las células [...]

Microscopio confocal

1. Introducción.

En un microscopio de fluorescencia convencional (p.ej., de campo amplio), el espécimen entero está sobresaturado de luz a partir de la fuente de iluminación. En la «epi-iluminación» del microscopio óptico convencional, la iluminación simultánea de todo el campo de visión en una pieza producirá siempre reflexión de luz en todo el espesor de [...]

Anticuerpos: nuevos usos en el laboratorio y en la clínica

10. ANTICUERPOS EN EL LABORATORIO Y LA CLÍNICA.

10.1. USOS DIAGNÓSTICOS Y TERAPÉUTICOS DE LOS ANTICUERPOS

10.2. USO DE ANTICUERPOS EN EL LABORATORIO

10.3. TERAPIA CON ANTICUERPOS MONOCLONALES

11. IDENTIFICACIÓN, PURIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE CÉLULAS

11.1. FACS (FLUORESCENCE ACTIVATED CELL SORTING)

11.2. MÉTODOS DE FASE SÓLIDA

11.3. MACS (Magnetic Activated Cell Sorting)

11.4. CITOTOXICIDAD MEDIADA [...]

Exploración de la respuesta celular

9. MÉTODOS DE EXPLORACIÓN DE LA RESPUESTA CELULAR.

9.1. ESTUDIO DE LINFOCITOS T.

9.1.1. INTRADERMO-REACCIÓN o EPICUTI-REACCIONES.

9.1.2. TEST DE INHIBICIÓN DE LA MIGRACIÓN DE MACRÓFAGOS.

9.1.3. TEST DE LINFOPROLIFERACIÓN O TRANSFORMACIÓN LINFOBLÁSTICA.

9.1.4. ANÁLISIS DE CITOTOXICIDAD POR LIBERACIÓN DE CROMO RADIACTIVO.

9.1.5. CUANTIFICACIÓN DE LINFOCITOS T.

9.1.6. VALORACIÓN DE CITOCINAS TRAS ACTIVACIÓN.

9.2. ESTUDIO [...]

Aislamiento y producción de anticuerpos

8. AISLAMIENTO Y PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS.

8.1. OBTENCIÓN DE ANTISUEROS (ANTICUERPOS POLICLONALES).

8.2. PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS ESPECÍFICOS. TÉCNICA DE HIBRIDACIÓN DE CÉLULAS SOMÁTICAS o HIBRIDOMAS (Kohler y Milstein).

8.3. REDUCCIÓN DE SU INMUNOGENICIDAD. SÍNTESIS DE ANTICUERPOS QUIMÉRICOS

8.3.1. Disminución de la Inmunogenicidad de los anticuerpos

8.3.2. Variantes biotecnológicas

8. AISLAMIENTO Y PRODUCCIÓN DE ANTICUERPOS. Obtención [...]

Citometría de Flujo

7. CITOMETRÍA DE FLUJO.

7.1. FUNDAMENTO

7.2. ESTRUCTURA BÁSICA DE UN CITÓMETRO DE FLUJO

7.3. INFORMACION OBTENIDA POR CITOMETRIA DE FLUJO

7.4. ANÁLISIS DE DATOS

7.5. VENTAJAS E INCONVENIENTES DE LA CITOMETRIA DE FLUJO

7.6. QUÉ DATOS PODEMOS OBTENER DE LAS CÉLULAS UTILIZANDO UN CITÓMETRO DE FLUJO? A QUÉ VELOCIDAD?

7.7. QUÉ APLICACIONES TIENEN LOS [...]

Reacciones de precipitación (II): electroforesis

2. REACCIONES DE PRECIPITACIÓN: Electroforesis.

2.1. ELECTROFORESIS.

2.2. INMUNOELECTROFORESIS (IEF).

2.3. RADIOINMUNOELECTROFORESIS.

2.4. ELECTROINMUNODIFUSIÓN.

2.4.1. ELECTROFORESIS DE CONTRACORRIENTE.

2.4.2. ELECTROINMUNODIFUSIÓN CUANTITATIVA O ELECTROFORESIS ROCKET.

2.4.3. ELECTROFORESIS CRUZADA DE LAUREL.

2.5. INMUNOFIJACIÓN.

2.5.1. CARACTERÍSTICAS

2.5.2. ESQUEMA DE LA TÉCNICA

2.5.3. GAMMAPATÍAS MONOCLONALES

2.5.4. TIPOS DE COMPONENTES MONOCLONALES

2. REACCIONES DE PRECIPITACIÓN: Electroforesis. 2.1. ELECTROFORESIS.

Separación de [...]

Inmunofluorescencia

5. FLUORESCENCIA

5.1. ESPECTRO DE FLUORESCENCIA

5.2. ELECCIÓN DEL FLUOROCROMO

5.3. MICROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA

5.3.1. FUNDAMENTO.

5.3.2. PRINCIPIOS GENERALES DE MARCACIÓN DE ANTICUERPOS POR SUSTANCIAS FLUORESCENTES

5.3.3. TIPO DE INMUNOFULERESCENCIA

5.3.4. INFLUENCIA DEL TIPO DE ANTICUERPO.

5.4. REACCIONES DE INMUNOFLUORESCENCIA EN FASE SOLUBLE.

5.4.1. INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA (IFD).

5.4.2. INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA (IFI).

5.4.3. INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA AMPLIFICADA [...]

Reacciones inmunoenzimáticas II

4. REACCIONES INMUNOENZIMÁTICAS II.

4.1. RADIOINMUNOENSAYO (RIA).

4.1.1. RIA EN FASE LÍQUIDA.

4.1.2. RIA EN FASE SÓLIDA.

4.2. DETECCIÓN DE PROTEÍNAS SOBRE SOPORTES.

4.2.1. DOT-ELISA.

4.2.2. WESTERN BLOT (WB).

4.2.3. ELISPOT.

4. REACCIONES INMUNOENZIMÁTICAS II. 4.1. RADIOINMUNOENSAYO (RIA).

El principio general del RIA es la INHIBICIÓN COMPETITIVA de la unión de un Ag radioactivo, conocido [...]

Reacciones inmunoenzimáticas

3. REACCIONES INMUNOENZIMÁTICAS.

3.1. ENZIMOINMUNOANÁLISIS

3.2. PASOS GENERALES DE UN ELISA

3.2.1. REACTIVOS QUE GENERAN COLOR.

3.3. TIPOS DE ELISAs

3.3.1. ELISA DIRECTO

3.3.2. ELISA INDIRECTO

3.3.3. ELISA SANDWICH

3. REACCIONES INMUNOENZIMÁTICAS.

Revelan la presencia de Ag o Ac mediante una reacción Ag-Ac específica, en la que el complejo inmune formado se mide por una [...]

Reacciones de hemaglutinación y lisis

2. REACCIONES DE HEMAGLUTINACIÓN Y LISIS.

2.1. AGLUTINACIÓN.

2.1.1. AGLUTINACIÓN DIRECTA.

2.1.2. AGLUTINACIÓN INDIRECTA.

2.1.2.1. AGLUTINACIÓN INDIRECTA EN PORTA.

2.1.2.2. HEMAGLUTINACIÓN INDIRECTA.

2.1.3. INHIBICIÓN DE LA HEMAGLUTINACIÓN.

2.2. REACCIONES DE LISIS.

2.2.1. REACCIONES PARA MEDIR EL COMPLEMENTO.

2.2.1.1. CAPACIDAD HEMOLÍTICA (CH50).

2.2.1.2. HEMOLISIS RADIAL SIMPLE.

2.2.1.3. OTROS MÉTODOS PARA MEDIR EL COMPLEMENTO.

2.2.1.4. REACCIONES QUE [...]

Reacciones de precipitación

1. REACCIONES DE PRECIPITACIÓN.

1.1. TÍTULO DE ANTICUERPOS.

1.2. REACCIONES DE NEUTRALIZACIÓN.

1.3. REACCIONES DE PRECIPITACIÓN.

1.3.1. INMUNODIFUSIÓN RADIAL SIMPLE (RID) O TÉCNICA DE MANCINI.

1.3.2. INMUNODIFUSIÓN DOBLE TIPO I (IDD-I).

1.3.3. INMUNODIFUSIÓN DOBLE TIPO II (IDD-II) U OUCHTERLONY.

1. REACCIONES DE PRECIPITACIÓN. 1.1. TÍTULO DE ANTICUERPOS.

El título de Ac es la mayor dilución [...]